GRE科目考试:生物学:理解西方印迹
GRE学科测试:生物学的学习概念，示例问题和解释
例子问题
例子问题1:电泳和印迹
在进行western blot时，添加二抗的目的是什么?
确保一抗与样品正确结合
允许检测蛋白质样本
阻止任何来自膜的干扰噪声
将样品与其他蛋白质分离
允许检测蛋白质样本
通常，二抗被设计成具有荧光或比色标记以允许检测。一抗与感兴趣的蛋白质结合，但(通常)没有自己的标签。蛋白质样本已经在电泳过程中被正确分离。噪声通过各种方法被阻断，但不是通过二抗。二抗不影响一抗的结合。
例子问题1:电泳和印迹
一名学生研究人员在细胞培养中过度表达了一种外源性蛋白质，他想确定这种蛋白质是否真的过度表达了。什么技术能最好地证明这种蛋白质在这些细胞中表达?
免疫印迹
电泳迁移率漂移试验(EMSA)
其他答案都没有
北部的污点
印迹
免疫印迹
正确答案是Western blot。Western blots利用抗体检测细胞裂解液中的特定蛋白质。Northern blot检测样本中的特定RNA，而Southern blot检测样本中的特定DNA序列。EMSA检测蛋白质是否活跃，因此可以结合特定的DNA序列。
例子问题1:电泳和印迹
蛋白质在SDS-PAGE凝胶上运行后，执行转移。在Western blot协议中传输的目的是什么?
将蛋白质从SDS-PAGE凝胶移到硝化纤维膜上
没有其他答案
使样品中的蛋白质变性
用抗体探测凝胶以检测感兴趣的蛋白质
想象蛋白质在凝胶上运行
将蛋白质从SDS-PAGE凝胶移到硝化纤维膜上
在SDS-PAGE凝胶上运行蛋白质并按大小分离后，它们被转移到硝化纤维膜上。这就暴露了蛋白质，这样抗体就可以识别并结合到目标蛋白质上。一旦抗体结合，荧光二级偶联抗体将促进感兴趣的蛋白质的可视化。
问题4:电泳和印迹
以下哪一项不是酶联免疫吸附测定法(elisa)和免疫印迹法(western blots)这两种常用蛋白质检测方法的相似之处?
用针对抗原产生的抗体来检测蛋白质
组织样品必须均质，并提取蛋白质，以利用该试验
需要与标记物结合的抗体进行检测
从分析中得到的信息可以通过正确的控制进行量化
要求蛋白质在检测前已变性
要求蛋白质在检测前已变性
ELISA和western blot的主要区别在于ELISA检测到的是原始蛋白，而western在检测之前需要通过SDS-PAGE对蛋白进行变性处理。这使得western blotting更严格，更适合定量，尽管如果操作得当，这两种方法都可以定量评估蛋白质水平。
